La peinture des Pays-Bas méridionaux du XVe siècle reflète la prospérité économique et culturelle que connaît la région sous les ducs de Bourgogne. Installée à Bruges d'abord et à Bruxelles ensuite, la cour bourguignonne fait bénéficier les arts en général et la peinture en particulier de son prestigieux mécénat, comme en témoigne le Portrait d'Antoine de Bourgogne de Rogier van der Weyden.

L'essor économique et commercial des cités donne naissance à une nouvelle bourgeoisie opulente d'où émanent commandes privées et officielles, telle La justice d'Otton exécutée par Dirk Bouts pour l'hôtel de ville de Louvain. Sous cette impulsion, les peintres élaborent un style particulier, attaché au souci du détail et au rendu des matières, et se distinguent par leur facture lisse et la transparence de leurs glacis.

Les personnages bibliques ou historiques, souvent situés dans un cadre domestique, revêtent de somptueux costumes du XVe siècle. L'annonciation du Maître de Flémalle est, à cet égard, exemplaire. A côté des grands artistes déjà cités, auxquels on peut ajouter les noms de Hans Memling et Petrus Christus, le parcours propose une sélection de panneaux dus à des maîtres au nom d'emprunt (Maître de la Vue de Sainte-Gudule, Maître de la Légende de sainte Lucie, etc...) et se termine par la salle consacrée à Jérôme Bosch (Triptyque de la tentation de saint Antoine). L'école italienne est représentée notamment par Carlo Crivelli et l'école française par le Maître de l'Annonciation d'Aix.